HPLC的正确使用和科学保养
1、保持储液瓶清洁，定期清洗专用储液瓶；试剂瓶用作储液瓶时，应经常更换（
2.定期（如半个月）在稀硝酸溶液中超声清洗，保持过滤器通畅（
3.用HPLC试剂和新蒸馏水作流动相，所用溶剂的截止波长必须低于检测波长，非HPLC级试剂应过滤（HPLC试剂出厂前已使用0.02%）μ M膜过滤）。运动相必须进行脱气（
4.每天开始使用仪器，注意排气和排气，并确保泵头、流池等流道系统内无气泡（
5.保护塔，避免塔头大幅度波动和塔床扰动。如避免泵启动过快、压力上升过快、进样阀动作过慢引起柱压波动大（
6.采用保护（报警）柱，延长柱的使用寿命。如果污染物积聚在保护柱顶部，导致柱压升高、柱效降低、峰形恶化，使用前应将保护柱拆除并用强溶剂反冲或更换新的保护柱（
7）× 4.6 mm柱，绝对注射体积不应超过100μ g、 如果灵敏度允许，应尽量降低样品浓度，以减少绝对进样量（进样量可保持不变），这是保持高效液相色谱柱良好性能的重要措施之一（
8.经常用强溶剂清洗色谱柱，及时将强残留组分洗掉。用异丙醇-二氯甲烷（1:1）冲洗反相柱，用纯甲醇或异丙醇冲洗正相（硅胶柱）至少1H（
9），试验结束后，及时用合适的溶剂清洗柱和进样阀。特别是对于柱和进样阀隔夜清洗用足够的水将盐和缓冲溶液充分溶解，然后用甲醇或乙腈洗涤，并储存在乙腈中。正相色谱柱保存在非极性有机溶剂（如己烷）（
10）中。硅胶柱，如C-18和C-8，应控制好流动相的pH值，一般不低于2.5，不高于7.0（
11）。试着用流动相溶解样品。一是避免拖拉，二是避免体系中溶解度降低导致样品沉淀（
12），对堵塞或损伤严重的塔，必要时可拆除不锈钢滤板，并用超声波清除滤板堵塞清洗，并可拆除、填充和修复被坍塌污染的柱床。这可以在一定程度上恢复柱效（80%），具有继续使用的价值（
13）。色谱仪的检测器输出应与积分器（处理器）匹配，并合理设置斜率、半峰宽、阈值、aufs值、衰减等参数。通过结合适当的进样量和适当的参数（
14），主峰约为记录仪满刻度的80%。通过HPLC分析酸碱物质，由于吸附（二次保留）使峰开尾。加入调节剂可以大大提高积分峰的形状和精度。将军规则如下：（1）分析酸性物质可加入1%乙酸（2）分析碱性物质可加入10-20mmol/L三乙胺（3）同时加入1%乙酸和10-20mmol/L三乙胺
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