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鲜牛乳体细胞数有哪些检测方法?

编辑:养殖网 浏览: 391次

乳体细胞数是衡量奶牛生理健康的重要指标。高体细胞数直接表明奶牛患有炎症性疾病。患有炎症的奶牛生产的牛奶不仅营养含量低,而且在人们误饮后会导致大规模食物中毒,直接威胁饮用者的安全和健康。对牛乳体细胞数量的检测可以及时发现有炎症的奶牛,从而从源头上保证牛奶的质量。本文介绍了牛奶体细胞数的主要检测方法,对这些方法的特点进行了分类和总结,并对其进行了总结和展望这些方法的发展和应用。鲜奶中体细胞数量的检测方法有哪些?具体介绍:

1.体细胞来源及正常指标

奶牛乳腺正常时,泌乳中的体细胞主要是巨噬细胞,而乳腺发炎时,泌乳中的体细胞主要是白细胞,它们是机体与病原体斗争产生的免疫细胞和物质。当奶牛乳腺组织被感染时,90%以上是中性粒细胞。当细菌侵入乳腺组织并开始大量繁殖时,它会导致免疫细胞,如多核白细胞to逐渐接近感染部位,侵入乳腺囊泡并吞噬病原微生物。此外,在发生炎症反应时,巨噬细胞会大量增殖并产生一些化学介质,进一步加剧炎症反应,显著增强组织毛细血管的通透性,促进血浆白蛋白的分泌,免疫球蛋白等白细胞侵入乳腺腺泡腔形成白细胞吞噬细菌(

牛奶中的体细胞数(SCC)主要用于判断奶牛的乳房是否健康。例如,当乳汁中SCC增加时,可以判断亚临床乳腺炎,但乳汁中没有明显症状苏。此外,牛奶中的鳞状细胞癌也可以用来指示炎症反应的严重程度。一般来说,无乳腺炎的奶牛每毫升乳汁中的鳞状细胞癌少于200000个,临床乳腺炎或亚临床乳腺炎的奶牛每毫升乳汁中的鳞状细胞癌多于500000个(

2.常见检测方法

显微细胞计数法。人工显微镜计数法是一种直接检测方法,它是指直接检测新鲜牛奶样品,滴入载玻片,在显微镜下观察,人工计算所含体细胞。用该方法检测鲜牛奶中的体细胞的步骤如下:首先制备染色溶胶溶液,即取40毫升四氯乙烷和54毫升乙醇,摇匀,在65℃的温水溶液中加热3分钟,然后加入0.6克甲基蓝,混合均匀,置于4℃冰箱中,温度达到4℃时加入6毫升冰醋酸,室温保存;取一块干净的载玻片,分为4个小正方形,每个正方形的面积为1 cm2,然后用微型注射器吸取10μL新鲜牛奶样品,注入1 cm2的载玻片中,平放于培养箱中,用染色液干燥浸泡,最后形成均匀的载玻片;在300~500倍显微镜下观察载玻片上的染色细胞,体细胞数为结石根据某些标准进行测试。一般按“向上不向下,向左不向右”的计数规则进行计数,防止遗漏和重复。虽然该方法所用设备简单,易于在实验室外操作,但整个操作过于繁琐,工作量大,特别是在计数时容易出错。在人工显微镜计数方法的基础上,对荧光显微镜的计数方法进行了改进,即用专用缓冲液或染料处理鲜奶样品,然后用配备相应滤色片的荧光显微镜进行计数。一般来说,鲜奶中的蛋白质不会形成荧光和wil我不影响决定。脂肪球会形成黄绿色荧光。使用相应的滤色片可以将其阻断,仅能看到体细胞形成的红色荧光,从而更好地将荧光细胞与周围背景区分开来,有效提高计数的准确性(

加州细胞计数分析(CMT法)是一种间接检测方法。其原理是鲜奶中的体细胞与表面活性剂接触,如溴甲酚红紫、烷基硫酸锰、烷基芳基磺酸或氢氧化钠,这些表面活性剂能使细胞收缩和凝固,释放脱氧核糖核酸并凝聚,体细胞越多,凝聚越强d状态下,将形成更多的凝聚块。体细胞的数量可以通过计算这些浓缩块来估计。该方法设备少、操作简单、检测速度快、灵敏度高、价格低廉、结果准确,同一直接显微细胞计数法与过氧化氢酶活性也具有良好的相关性,且受环境温度影响较小。即使样品中有毛发等异物,也不会影响结果。适用于检测单个奶牛或总牛奶样本;缺点是只能获得相对数量的体细胞,这容易受到人为因素的影响。只有经过专门培训的人员才能执行此检查. 此外,这种方法有时会出现假阳性结果,例如鲜奶不新鲜或哺乳期结束时的牛奶。最好在哺乳中期检测牛奶。牛奶感染细菌后会产生毒素,导致体细胞的破坏,这将使临床乳腺炎阳性的牛奶(

pH检测方法呈阴性。该方法是一种间接检测方法。由于乳房炎后奶牛分泌的牛奶的pH值与体细胞之间存在一定的相关性,因此可以通过测量牛奶样本的pH值来确定体细胞的数量。测试时,从一次性皮氏培养皿中取约2ml新鲜牛奶样品,滴下相同的样品投加诊断液,同心摇动皮氏培养皿,30~60s判断结果。当测得的牛奶pH值在6.4~6.6之间时,判断每毫升牛奶含有0~200000个细胞;如果pH值在6.6和6.8之间,则判断每毫升有200000-500000个细胞;如果pH值在6.8到7.0之间,则判断每毫升含有500000到150万个单个细胞;如果pH值在7.0和7.2之间,则判断每毫升含有150万到500万个单个细胞;如果pH值超过7.2,则判断每毫升有超过500万个体细胞。该方法操作简单,但测试结果有时不准确54001

2.自动计数器计数:目前乳制品生产中的乳体细胞计数主要由大型体细胞仪完成。体细胞自动计数与分析的研究主要包括以下两个方面:

(1)流式细胞术。代表产品为Bently计数器、Flowserve fossomatic 5000、Dutch delta体细胞计数器等,该方法检测速度快,适合乳制品的集中检测,但仪器成本高,无法保留样品,需要熟练的手工操作,定期校正和监测,etc(

(2)另一方面,使用数字图像分析系统。典型产品,如韩国C-reader Adam somatic细胞计数器,数据准确,排除人为因素影响。由于该方法基于标准显微镜方法,因此在韩国已用于校正大型自动仪器,而不是标准方法。华成瑞光的牛二、牛三博士是这种检测方法的典型代表(

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