袁东波1尹念春2陈嘉树3
1.四川省南充市动物疾病预防控制中心南充637000(
2.四川省遂宁市动物疾病预防控制中心遂宁629000(
3.四川省南充市农牧局,637000
收货日期:2014年7月10日
袁东波,男,1980年生,预防兽医硕士
,近年来为大力发展养羊业,丰富我国优质绵羊品种资源,降低国外直接引种风险,绵羊胚胎移植在绵羊生产实践中得到了广泛的应用,并在快速扩张中取得了良好的效果纯种绵羊的品种。然而,绵羊胚胎移植的受胎率一直是制约纯种绵羊快速扩张的重要因素,引起了大家的关注。本文分析了影响绵羊胚胎移植受胎率的主要因素(胚胎供体
的质量与胚胎移植
的质量密切相关)。即使是紧密同步的供体和受体,如果移植异常胚胎,如细胞分裂不规则、细胞固缩、细胞生长迟缓等,移植后也会失败。因此,胚胎质量的鉴定在胚胎移植过程中非常重要(
1.1供体羊的年龄不同品种、不同质量的卵子
成年母羊的排卵移植成功率高于育成羊。在体外培养条件下,成年母羊胚胎正常发育的比例较大,比第一次发情前的年轻母羊(5~7个月大)发育更快、活力更强1.2治疗前成年母羊的激素环境
在性周期第16天注射怀孕的马血清促性腺激素(PMSG)后获得的90%以上的卵是受精卵,而在性周期第10天注射PMSG后获得的卵子不到90%。因此,成年母羊在tr前的激素环境治疗决定排卵期间卵泡刺激的时间。当卵泡受到刺激时,孕酮水平及其存在时间可能是决定卵子质量的一个重要因素(
1.3诱导超排期间的卵巢反应
如果超排后卵子的受精率较低,胚胎收集率和移植率将增加,妊娠率也较低。受精率低往往发生在一个供体安排的卵子中,甚至所有卵子都没有受精。卵子未受精的原因可能是雌性动物的内分泌紊乱和超排期间未成熟卵子的排出。就胚胎质量而言,每个卵巢排8~10个卵为宜
1.4泌乳母羊的排卵率较低
产羔母羊的胚胎活力低于干性泌乳母羊。在交换和移植两只母羊的胚胎后,结果表明,当注射相同剂量的促性腺激素时,在相同的饲养和管理条件下,供体(
1.5对激素
的不同个体反应是导致不孕的原因,有的个体超排效果好,排卵量大;有的没有超排效果,只排出一个卵子;有些人没有发情,甚至没有排卵。胚胎培养实验表明,虽然不同个体的卵处于同一发育阶段,但在相同的铜胁迫下在培养条件下,鸡蛋的活力变化很大。经验表明,当超数排卵后从供体收集更多受精卵,且卵子的发育阶段相对一致时,这些胚胎移植后通常可以获得更高的受孕率。这种母羊可以重复采集和转移(
1.6季节对超排效果和蛋质量的影响
实验表明,在深秋和初冬效果最好,其次是早春(www.nczfj)。夏季
2胚胎发育期和移植部位
2.1受体的妊娠率随移植胚龄
的增加而增加。转让公关3日龄胚胎的受精率最低,5日龄后的胚胎对逆境(如温度突变)具有良好的耐受性。研究表明,实际胎龄(或子宫环境)4天龄胚胎移植到受体子宫进行3天发情比3天龄胚胎移植到子宫进行3天发情具有更高的胚胎存活率(
2.2胚胎生殖道的形态和生理功能变化发情期母羊
绵羊的早期胚胎在输卵管中运行并停留约72小时,因此72小时前收集的早期胚胎应转移到输卵管中;超过72小时,胚胎进入子宫是由胎儿移植的,从子宫中采集的早期胚胎应移植到子宫中。一些实验指出,为了提高输卵管移植胚胎的存活率,满足发情后72小时或更长时间收集胚胎的条件,受体发情开始时间与供体发情开始时间的差异在早晚不超过12小时,以及移植8细胞胚胎,2.3胚胎移植的位置在胚胎移植中,胚胎移植的位置应根据移植胚胎的年龄和原始位置来确定。一般来说,移植部位往往与胚胎的部位相对应收集即从输卵管采集的胚胎移植到输卵管,从子宫角采集的胚胎移植到子宫角,以获得更好的移植效果。当胚胎移植到输卵管时,移植到深输卵管的妊娠率很高。当胚胎移植到子宫角时,年龄在5~6天的胚胎被移植到输卵管一侧(即子宫角的颈部)的子宫角连接处,其存活率高于子宫角中部。随后,随着天数的增加,胚胎移植的位置可以移到子宫角的底部。同步胚胎移植到子宫以获得更好的受孕率的时间差异范围比输卵管大。移植到子宫的胚胎通常是桑椹胚和囊胚。在母羊发情后第7天,卵巢静脉中的孕酮浓度达到最大浓度,并保持相对恒定,直到第15天。因此,在母羊发情后期,供体和受体可能有较大的同步时间,移植成功率较高(
3移植胚胎数
移植胚胎数对受孕率有很大影响。一般来说,双胚胎移植比单胚胎移植能获得更高的受孕率(
胚胎的体外保存在新鲜胚胎移植过程中,从胚胎从供体取出到移植到受体,胚胎在体外的停留时间和保存时间都很短。在此期间,胚胎及其保存液应置于密闭容器中,以防止保存液的蒸发和污染,保持保存液与胚胎之间的渗透压和无菌性,胚胎应在适宜的温度下保存。无论保存时间长短,都要求保存后移植的胚胎具有继续发育的能力。在体外培养和保存过程中,cpH值的变化对胚胎的存活是有害的。在移植过程中,胚胎体外温度迅速下降,移植成功率下降。受体在25~30℃下移植成功率高,但在5~15℃环境下
移植成功率低,从超低温环境(如液氮罐)取出的胚胎应在37℃下解冻(经验表明,当解冻温度调整到38~40℃时,可以更好地缓冲温度变化),以便快速跨越低温打击区,转移成功率高(
参考文献
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