奶牛生鲜奶中黄曲霉毒素M1含量高的主要原因是它们食用大量发霉的饲料和饲料，导致其体内含有大量黄曲霉毒素B1。黄曲霉毒素M1是通过体内代谢产生的，存在于肝脏、肾脏、乳腺和乳汁中，24小时后可在乳汁中检测到黄曲霉毒素M1。本文主要介绍了奶牛鲜奶中黄曲霉毒素ml的产生和黄曲霉毒素ml的检测方法。让我们进一步了解：

1产生和危害

哺乳动物主要食用被黄曲霉毒素BL污染的饲料或食物，导致牛奶中黄曲霉毒素ml的分泌。一般来说，当农作物在生长过程中遇到各种自然灾害时在这个过程中，如干旱、早霜、病虫害、倒伏等，以及不合理的加工、运输和收获后的贮藏，如贮藏湿度高，都容易感染黄曲霉。在适宜的温湿度条件下，会产生一定数量的黄曲霉，黄曲霉毒素是其代谢产物（

奶牛饲喂被黄曲霉毒素BL污染的饲料后，传入的黄曲霉毒素BL会逐渐与微生物相互作用，其中10%的作用毒素在瘤胃内细菌的作用下降解，其他毒素被瘤胃吸收到血液中，并被体内的肝微粒体单氧化酶系统通过t细胞色素P-450的调节，黄曲霉毒素BL末端的呋喃环C-10被羟基化产生黄曲霉毒素ml。由于黄曲霉毒素ml没有活性，它可以通过尿液直接排入体内，或通过粪便或牛奶与葡萄糖醛酸转移酶结合，而有的能残留在肌肉中（

黄曲霉毒素ml进入动物或人体后，不仅能抑制RNA和DNA的合成，还能抑制肝脏蛋白质的合成，引起机体中毒，主要表现在以下三个方面：损伤组织器官；抑制免疫功能；致畸、致癌性和致突变性，导致人和动物的胃癌、肾癌和肝癌（

2.检测方法d

薄层色谱法。该方法用于牛奶中黄曲霉的测定。经典的毒素ml含量测定方法是一种相对定性或半定量的检测方法。其原理是对牛奶样品进行提取、浓缩和薄层分离，使黄曲霉毒素ml在36B nm波长的紫外光下发出蓝紫色荧光，从而根据标准溶液的荧光强度和薄层板上指示的最小荧光检测量计算其含量。分析时先配制黄曲霉毒素ml标准溶液，即用三氯甲烷配制浓度为10；UG/ml黄曲霉毒素ml标准品溶液置于波长为3B7nm的紫外分光光度计中测定标准溶液的准确浓度，然后置于4℃避光保存备用。然后提取样品，即液体样品直接加入甲醇中，摇匀后过滤。萃取液可先用氯化钠溶液和石油醚分散纯化，再用氯仿进行相转化萃取，再用氯化钠溶液水洗，再用无水硫酸钠脱水，收集氯仿层，置于通风良好的65℃水浴中逐渐干燥，最后，蒸发皿中的残留物被转移到浓缩管中通过氯仿，用减压吹扫法将溶液浓缩至适当体积备用。点样色谱法，显色测定，即分别取标准溶液10ul和浓缩溶液10ul，滴于硅胶G薄层板上（105℃活化2h），放入显色筒中（预先加入一定量的显色剂），注意垂直和水平展开的结合，挥发后在紫外灯下观察，测量其Rf值。黄曲霉毒素ml的RF值一般为0.34，也应与标准溶液的最低检出量（0.0004；比较荧光在荧光点喷洒适量硫酸溶液（1:3）显色剂进行确认试验，最后根据标准溶液的最低检出量、样品称量值计算黄曲霉毒素M1的含量，浓缩体积和总稀释倍数（

snap法。主要基于酶联免疫吸附试验的竞争原理，即样品中所含的黄曲霉毒素ml与定量特异性酶标抗体反应，多余的游离酶标抗体与酶标板中的包被抗原结合，流动水洗后加入适量的酶显色底物最后与标准点进行定性比较。测试前，打开快速加热器和黄曲霉毒素ml检测仪进行预热。快速加热器温度应达到（45±5）℃，然后取出包装内的黄曲霉毒素ML检测试剂盒备用；待测生鲜乳的温度应控制在15—30℃之间，排列整齐。将加热器的加热时间和反应时间分别调整为5分钟和4分钟。试验过程中，摇动待测鲜奶，取出黄曲霉毒素ml检测试剂盒中的支撑吸管，用（450±50ul）标准线将待测牛奶样品加入试剂瓶中，摇动试管，使反应快速进行ent球完全熔化，然后将试管放入预热的加热器中，孵育样品5分钟，然后立即取出样品试管，将样品加入snap kit的样品孔中，样品通过反应窗口流向反应活化环。当绿色反应环即将褪色时，立即按反应激活键使其与snap kit平齐。听到清脆的按钮声后，按反应键。反应4分钟后，取下snap试剂盒并将其放在读卡器上，以将其降低至快速读数，I类抗生素读数。要求在反应完成后10分钟内阅读。如果读卡器读数高于1.05，t检测结果为阳性；如果读数低于1.05，则测试结果为阴性。此外，观察试剂盒样品点和参考点的颜色变化和深度。如果采样点的颜色比参考点浅，则结果为正值；如果采样点的颜色等于或深于参考点，则结果为负值。如果参考点的颜色没有变化，则应再次测试样品，并通过定量方法（

进一步确认结果为阳性的样品

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