鸡新城疫血凝抗体监测应注意的问题
铁岭市动物检疫站（铁岭112000）
新城疫（NDV）是危害鸡群的一种严重传染病。新城疫的防治应按免疫程序进行。而初次免疫年龄的确定、免疫后机体反应的效果、二次免疫的间隔时间等都取决于体内抗体水平。该抗体可存在于动物血清中，并可通过免疫监测进行检测。然而，在免疫监测的实际操作中，监测结果受到诸多因素的影响。Nd抗体效价检测应注意以下几个问题：
1抗原
免疫监测本质上是一个抗原抗体反应的过程。在这里，必须正确校准抗原的效价。每次监测前，必须准确测定抗原的效价。同时测定2-3次，得到平均值，然后根据其准确滴度配制所需的病毒溶液（如4单位病毒）（在
2抗体方面，取血清作为供试品检测
抗体水平。取样过程和装有样品的试管不得受到污染，不得含有杂质，不得含有与抗体无关的蛋白质。也不能加抗凝剂，不能有溶血基质否则血清不易分离或影响其抗体效价。分离血清应为淡黄色透明液体
红细胞的制备非常重要。红细胞应该从未免疫的成年公鸡身上采集。不成熟的公鸡容易溶血，不能使用。反复离心、洗涤后，最好制备0.75%的红细胞。实践证明，0.5%和1%的红细胞不如0.75%。这是因为目前常用的微量法是在96孔反应板上进行的。红细胞的数量也会影响结果，过多或过少都会影响结果的准确性（
4操作过程
免疫监测是一种血清学检测，应从科学的角度对待。应注意以下几点：
4.1加样时，必须掌握各成分的准确剂量。移液管是定量的，但受操作人员手的力的影响，当力不均匀、吸量不均匀、力为正时，校准秤能吸收等量的样品溶液，这是一个需要熟练技术人员反复操作的过程。请注意，在取样过程中，每个取样头中不应有气泡。如果有气泡，体积将被占用，取样量将不准确ate，导致检测结果的误差（
4.2在每个抗体监测中应做回归试验，每个反应板应做回归试验。还必须有标准阳性对照和标准阴性对照，以反映每个反应板中每个待测样品的真实情况。由于受外界因素的影响，4单位病毒常发生变化，因此样本检测结果的准确性可根据回归试验的结果来判断（
4.3抗体免疫监测试验可在室温下进行，但不同温度下检测结果的时间不同。最适条件为22～28℃, 反应可以在n在条件允许的情况下放入培养箱。在自然条件下，不用培养箱也可以反应，但要掌握观察结果的时间（
4.3在操作过程中，加入抗原和抗体后，在微振子上振荡一次（1min），动作后再加入红细胞，进行第二次振荡（1min）。这两种振荡的目的是使样品充分混合，达到充分的效果。然后放入22~28的温度箱中℃ 或室温下，等待观察结果（
5）观察和记录结果
反应可分为两个阶段。第一阶段是抗原抗体特异性结合阶段，发生很快，但肉眼看不见；第二阶段肉眼可见，需要电解质，受多种因素影响。如果反应温度在25℃左右℃, 结果可在15～18min内观察到；如果放置在15~20℃, 观察18～22min；如果温度低于15℃, 25分钟后观察结果。观察时应记录观察结果，观察结果应在2～3分钟内再次观察并记录，以核对第一次结果。如果两个结果相同，但第二个结果比较明显，可以说检测成功。如果有可疑样品，他们应每隔2分钟观察一次。如果不能准确测定结果，应重复操作一次（新城疫抗体免疫的临界hi值为1:16～32或40，鸡的免疫器官在7日龄时已接近成熟。雏鸡对新城疫疫苗的免疫应答随着年龄的增长而增强。科学计算初免年龄和加强免疫时间的公式为：最佳初免年龄=半衰期×（ 1日龄雏鸡HI抗体滴度几何平均值的对数为-4）+5（
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