鸡减蛋综合征(EDS-76)研究进展
减蛋综合征（EDS-76）是由腺病毒引起的一种病毒性传染病。其特点是产蛋量突然下降，蛋壳异常，蛋体异常，鸡蛋品质差。产卵下降综合征（EDS-76）由vaneck于1976年首次报道，该病发生在荷兰。1977年分离到EDS-76的病原（病毒），该病可使鸡产蛋率降低10～50%，虫卵损伤率达38～40%（darbyshire，1980），无壳蛋和软壳蛋的损伤率达15%，给养鸡业带来严重经济损失，被列为四大病毒性传染病之一。因此，世界各国都十分重视。用频率我国近年来发现了一种新的EDS-76病，在各个方面的研究都取得了很大进展
1.EDS-76的形态特征：
EDS-76的病原是腺病毒，属于无包膜双链DNA病毒。EDS-76的粒径为76-80nm。病毒颗粒为二十面体。衣壳有12个顶部，30个边缘和252个壳颗粒。其中240个六聚体和12个五聚体位于二十面体的顶端（电镜下的超微结构）。腺病毒的衣壳结构和衣壳颗粒数是腺病毒的典型特征。病毒DNA分子量为22.6× CELO的分子量为28.9× 106天与哺乳动物腺病毒
相似。2.病毒的免疫学和血清学特征：
口服EDS-76病毒7天后，血清中可检测到HI抗体。HI抗体在14～21d达到高峰，HI效价在1:1280～1:2560之间，30d后开始下降，但始终能检出HI抗体。AGP试验抗体在口腔感染后6～9天可检出，15天后开始下降。接种后6d可检测到VN抗体。接种后6～7天可检测到ELISA抗体。EDS-76病毒含有红细胞凝集素，可作为鸡、鸭、鹅红细胞的疫苗凝集。其他er型禽腺病毒主要凝集乳红细胞，与EDS-76病毒
不同。3.病毒的理化特性：
EDS-76病毒具有抗乙醚能力，对乙醚和氯仿在50℃不敏感℃. 它对不同的pH值范围都很稳定，即对pH值的耐受范围很广，如能在ph3～10的环境中存活，在56℃加热能存活3小时℃, 加热到60℃时失去致病性℃ 持续30分钟，70℃加热后完全消失℃ 20分钟。在室温下至少能存活6个月。0.3%甲醛24小时，0.1%甲醛48小时能完全杀灭病毒（
4.存活特性病毒特性：
EDS-76病毒能在鸭肾细胞、鸭胚成纤维细胞、鸡胚肝细胞、鸡肾细胞和鹅胚成纤维细胞上生长，增殖良好；鸡肝细胞、鸡胚成纤维细胞和火鸡细胞生长不良；它不能在哺乳动物细胞上生长。尿囊液具有很高的血凝效价218；接种于5～7日龄鸡胚卵黄囊后，胚体萎缩，孵化率下降（
5.EDS-76病毒的分离：
自1976年荷兰Van Eck发现EDS-76病毒和1977年分离EDS-76病毒以来，各国相继分离出EDS-76病毒株：（1）1978年，McFerran J.B.从北爱尔兰的鸡鼻粘膜中分离出mc-127菌株，即“血凝因子127”（2）Baxendale（1978）从英国鸡外周血细胞中分离出bc-14株（3）D-61株由英国milliton禽病研究所从病鸡泄殖腔中分离出来（4）B8/78株由匈牙利研究人员分离出来（5）TN株从台湾分离出来（5）6）分离自日本（7）38株的H-62、JAP-1、KE-80和ME-80，从法国进口的鸡中分离到77株（8）EDS-7，从南京农业大学中国大陆引进的第一批海参鸡中分离得到，6株，命名为NE4株。从江苏农业大学分离到H91-1菌株大学（朱国强，1992）。从江苏省畜牧医院分离到GS-1菌株。CH-1菌株是从四川省畜牧兽医研究所（1992）分离到的，分布于：
EDS-76是世界上流行的菌株。除中国大陆和台湾地区外，该病在欧洲也有发现，包括荷兰、法国、英国、意大利、德国、西班牙、丹麦、比利时、瑞典、挪威、俄罗斯、南斯拉夫、奥地利、波兰、匈牙利、希腊、卢森堡、以色列等；美国、巴西、阿根廷、墨西哥等；非洲的安哥拉和尼日利亚；大洋洲的新西兰和澳大利亚；在亚洲，日本、印度、伊拉克、韩国、新加坡等都被发现有这种疾病。该病已在中国大陆发现以及北京、广州、鞍山、大连、天津、济南、广东、上海、无锡、山东、山东、山东、山东等地(EDS-76易感动物：
EDS-76病毒不仅能感染不同品种、不同年龄的鸡，而且能在鸭、鹅、野鸭、珍珠鸡、火鸡、鹌鹑、俄罗斯鸭、北京鸭、天鹅、加拿大鹅、鸭、海鸥、麻雀、猫头鹰、鹳、白鹭体内产生抗体和排泄病毒。鸭感染后虽未发病，但长期携带病毒，病毒携带率可达80%以上
3.传播方式和途径：
EDS-76主要通过垂直传播，也有水平传播。五生殖传播是指将受感染的精液和带有胚胎的卵子传播给下一代（McFerran等人，1978年）。横向传播主要是通过唾液、泄殖腔排泄物排毒。自然感染是口腔感染。受污染的鸡蛋、蛋容器、养鸡场、饲料和用具是常见的传播媒介（
4.流行形式：
EDS-76的流行一般发生在产蛋50%至产蛋高峰期，即25-35周龄期间，产蛋量一般下降10-25%，达30-50%，持续4-10周，然后恢复到原来的水平。产蛋曲线呈马鞍形（见图1）。Pejkovski et al.（1982）报告说，33.9%的病人第1周畸形，第2周49.4%，第3周39.6%，第4周26.1%，第5周逐渐恢复正常。baxendale（1977）对自然感染EDS-76鸡的观察表明，EDS-76主要发生在26～32周龄。病鸡受精率正常，但孵化率明显下降，死胚率由6～8%提高到10～12%。EDS-76的水平传播速度很慢，病毒在整个大楼内传播需要几个星期。鸡粪是鸡粪水平传播的主要途径，地面饲养比笼养快（流行因子：
（1）t）鸡病毒的激活：鸡在性成熟前为隐性感染。当病毒离开分娩时，病毒所遇到的应激因素会引起激素分泌的变化，从而使EDS-76病毒的启动子活化，从而导致疾病的发生。因此，只有在分娩初期才出现临床症状（
（2）鸡的易感性：EDS-76的流行主要取决于病毒的毒力和鸡对病毒的易感性。20周龄以下雏鸡EDS-76病毒感染率仅为8%；20周龄以上鸡的感染率较高，可能与o变化和产蛋量。微量血凝抑制（MHI）试验表明，公鸡对该病的敏感性高于母鸡（辛胜鹏，1993）（
（3）检疫不严：未经严格检疫和观察，进口种鸟感染该病。该病是在没有严格检疫的情况下从外省州传入我国许多地区的（
（4）种蛋的选择是不利的：在选择种蛋时，衰退期的种蛋和异常种蛋没有完全消除，造成该病垂直传播（
（5）消毒不严或消毒效果不准确：因为EDS-76病毒对某些化学物质有较强的抵抗力感染性药物，一般消毒药物难以发挥作用。因此，必须选择合适的消毒剂并达到一定的消毒时间（
(6） 未接种疫苗：由于该病是我国近年来出现的一种新疾病，容易被忽视，大部分未接种疫苗，或部分疫苗接种效果不佳，导致鸡对病毒高度敏感，一旦发病，易传播（临床症状：
EDS-76病鸡主要表现为产蛋量下降。有些病鸡可能有精神不好、厌食、羽毛蓬松、贫血和腹泻等症状。据报道，一些鸡在下蛋前已经感染了这种疾病他们的一生都不会达到顶峰。在鸡蛋产量下降的同时，鸡常会产生各种异常的鸡蛋，如蛋壳收缩、蛋形改变、蛋壳表面有不同数量的灰斑、蛋壳颜色改变、褐色蛋壳褪色为灰白色，还有软壳蛋、无壳蛋，甚至这种蛋一天也能产几个。蛋清像水一样薄，里面有一些混浊的絮状物。感染该病的中年雏鸡没有临床症状。当老雏鸡感染此病时，在出现异常虫卵前后可能出现轻度腹泻症状。由于感染EDS-7鸡的年龄不同6、感染程度不同，对未来产蛋的影响也不同。据报道，174日龄最少，214日龄次之，259日龄最重（赵青，1992）（
2.病理改变：
鸡常缺乏明显的病理改变。特征性病变为输卵管各段粘膜的炎症、水肿和萎缩。病理改变为卵巢萎缩、或出血、子宫黏膜炎症、肠长等炎症综合征。组织病理学检查可见输卵管腺水肿，单核细胞浸润，子宫内膜变性坏死粘膜上皮细胞。浆细胞、淋巴细胞和嗜异性细胞浸润子宫黏膜和输卵管固有层。输卵管上皮细胞核内有包涵体、核仁和染色质。包涵体中有的嗜酸性，有的嗜酸性。人工感染SPF鸡后，子宫内出现淋巴滤泡，其他器官无明显变化。Moorthy（1987）报道，感染127株病毒的来航鸡，其典型的组织病理学改变为肺、肝、肾、腺胃出血、淋巴细胞浸润、输卵管萎缩、卵巢纤维化等alacia，无其他明显病理改变（EDS-76鸡产蛋异常是由于EDS-76病毒对靶器官的损伤和复制部位输卵管功能的异常所致）。健康鸡输卵管漏斗和峡部的pH值为6.5± EDS-76鸡的pH值为6.0± 3（Van Eck，1979），表明子宫黏膜pH值发生变化，导致黏膜分泌功能障碍。由于酸度的增加，大量的钙被溶解，从而阻碍了蛋壳的形成。荧光抗体的定位结果表明。EDS-76病毒可引起粘膜上皮细胞变性和脱落，子宫胞质内分泌颗粒减少或消失，腺体细胞萎缩，使钙离子转运紊乱，色素分泌减少，输卵管pH值明显降低。这种酸性环境能溶解蛋壳腺分泌的碳酸钙，阻断钙沉积，从而形成蛋壳紊乱和蛋壳畸形。由于输卵管功能异常，鸡的正常产蛋周期和排泄机制受到干扰和破坏，导致产蛋率下降或停止产蛋（
诊断
，因为许多疾病和环境因素会导致鸡产蛋量下降人工饲养的鸡，其诊断必须根据疾病的流行特点、临床症状、病理变化、血清学和病原分离鉴定（流行特点：
一般发生在产蛋50%期和产蛋高峰期之间，即，25-35周龄（
2.临床症状及病理变化：
在正常饲养管理条件下，突然发生不明原因群体产蛋量下降，并伴有卵子异常、蛋壳褪色、变薄、蛋质下降。尸检有典型的生殖道病变。包涵体染色观察包涵体。如果没有其他规范根据临床表现，本病可初步怀疑为早期诊断（
3.病毒的分离和鉴定：
从感染鸡的输卵管、畸形卵泡、无壳软卵、泄殖腔和鼻咽粘膜中，孵育72～96小时，观察细胞和核包涵体的病理变化（包括体染色），并通过血凝（HA）和血凝抑制（HI）试验进行鉴定。细胞培养效价用hi阳性对照血清测定。接种于5～10日龄鸭胚尿囊腔，可杀灭鸭胚，尿囊液凝集效价高。EDS-76的分离率约为63%. 血清学方法
（1）血凝抑制试验：
这是诊断EDS-76最常用的血清学方法之一，其原理是EDS-76病毒含有红细胞凝集素，它能凝集鸡、鸭、鹅红细胞，并能被相应的EDS-76病毒抗血清抑制凝集，具有较高的特异性和敏感性。HI试验多采用微量法，故又称微量血凝抑制试验（mhit）。本实验所用抗原是从鸭肾或鸡肾细胞培养物或鸭胚尿囊液中制备的。四血凝抗原采用4个Hau，pH值为7.1pbs。指标体系所用红细胞为0.8～1%的鸡红细胞。采用常规手术方法。目前hi阳性的标准尚未统一。有些人认为1:32是积极的，而另一些人认为1:8是积极的。B.N。bruyev报道，新鲜鸡血清在感染eds76（
（2）琼脂扩散（AGP）试验后2-3周内HI滴度为1:1280-1:2560，在连接处形成可见沉淀线，该方法可用于检测EDS-76病毒抗原或抗体。据检察官说rbyshire的方法，在含有1.5MNaCl PBS（0.01M，ph7.2）（
（3）的1%琼脂平板上进行病毒（VN）试验：
EDS-76病毒可引起组织学改变并产生核内包涵体，其作用可被相应的抗血清中和，因此本试验可用于检测EDS-76抗原或血清抗体（
（4）免疫荧光法：
baxendale（1977）用荧光法证实EDS-76病毒与其它禽腺病毒具有相同的抗原成分（抗原决定簇）。Adair（1978）用荧光技术证明EDS-76病毒主要位于感染细胞的细胞核内。Mockett等人（1984）也获得了同样的结果（
（5）ELISA:
ro采用常规手术方法
（6）iBT：
常规手术方法
诊断EDS-76，AGP的敏感性略低于if和HI。ELISA、AGP和hi对EDS-76病毒感染的检测结果表明，ELISA比AGP更敏感，与hi相似，但ELISA可嵌入两种抗原，简化了与其它禽腺病毒感染的鉴别诊断。Piele（1985）用Hi、ELISA和AGP检测了不同时间点实验感染鸡血清和蛋黄中的EDS-76抗体。他认为氯仿可以提取蛋黄适用于Hi、ELISA和AGP试验（
（1）EDS-76与传染性支气管炎的区别：传染性支气管炎除有滴卵外，还有明显的呼吸道症状、气管锣鸣音、喘息、咳嗽等，etc（
（2）EDS-76与非典型新城疫的区别：非典型新城疫也可引起产蛋量下降，产生软壳蛋。然而，同时鸡群中会有死鸡。对整群鸡进行新城疫抗体检测，即可得到鉴定。死鸡死后病理变化包括喉、气管、腺胃、盲肠、扁桃体、直肠、泄殖腔粘膜出血（
（3）E）DS-76与脂肪肝证型的区别：脂肪肝综合征是鸡的一种代谢性疾病，肝脏脂肪变性异常，产蛋量骤减，冠色苍白，死亡率高。主要发生在肥胖的鸡身上。尸检发现死鸡肝脏肿大，易碎，黄褐色，肝破裂出血（
（4）EDS-76与钙、磷、维生素A、D缺乏综合征的区别：钙、磷、维生素A、D缺乏综合征也引起产蛋量下降，无壳蛋、软壳蛋，早产。蛋壳腺功能不正常，不能分泌足够的壳物质产生壳卵。当钙、磷和维生素在饲料中加入A.D后，其产蛋率迅速恢复（
（5）EDS-76与新城疫（nd）、传染性支气管炎（IB）、脑脊髓炎（AE）等引起产蛋率下降的疾病的产蛋率曲线比较如图1所示（目前尚无有效的治疗方法，因此，防控工作仍然贯彻“预防为主”的方针，主要措施是“净化、免疫、监测”（严格检疫：从境外或其他地方引进鸡、蛋时，要严格检疫，并对鸡进行一段时间的隔离观察，以达到及时早期防治（
2.P净化措施：鸡龄超过40周时，如果母鸡有抗体，且卵子正常，则取卵子孵化雏鸡，将雏鸡分为若干组，每6周测定一次HI抗体，排除阳性组。当这一代鸡达到40周龄时，从阴性组中采集下一代的种蛋，直至达到消除的目的。McFerran，J.B.等人建议，应进行长期的血清学检查，采用HI试验监测鸡的感染情况，对阳性鸡进行屠宰，并进行长期的持久性试验，以达到净化（免疫）的目的结论：免疫接种是该病的主要预防措施。Bc14疫苗或鸭胚细胞疫苗是在该病首次在欧洲传播时，通过添加油佐剂消除病毒而制成的，取得了满意的效果。最常用的单一疫苗是bc14株油醛疫苗。用该疫苗接种18周龄母鸡后，肌肉注射或皮下注射疫苗0.5ml。15天后抗体可维持12～16周，然后开始下降，40～50周后消失。在湖南使用B8/78株灭活疫苗。95%免疫鸡的HI抗体在免疫后3周达到高峰（发育期）二价疫苗方面，我们采用研制的EDS-76病毒127株和鸡新城疫灭活油佐剂疫苗，取得了良好的效果。例如，bouquet等人使用了127个细胞培养物和鸡新城疫病毒株的鸡胚尿囊液β- 经丙酮内酯灭活后，将该疫苗接种于17～18周龄雏鸡，表明该疫苗具有良好的保护效果和安全性。用Zanella a
研制的二价灭活疫苗接种16～20周龄蛋鸡，鸡新城疫和EDS-76的HI抗体滴度达27～210。研制了鸡新城疫-落蛋综合征-传染性法氏囊病（nd-EDS-76-ibd）灭活疫苗在国外。效果明显，相互间无免疫干扰。蛋鸡能产生很强的免疫效果。免疫期6个月以上，必要时可反复接种（
4.防治措施：
当出现EDS-76时，虽然目前尚无有效治疗方法，但可采用EDS-76高免蛋黄注射液、肌肉注射或皮下注射2毫升给每只病鸡，并补充维生素、钙、糖等改善营养状况，这有一定的治疗效果，特别是早期使用，效果更好。目前，一些养鸡场采取了以下综合措施，取得了一定的成效（
（1） 21～35周龄蛋鸡饲料中可添加土霉素和三唑酮，防止产蛋量下降。防治量：每吨饲料中添加土霉素50～75g，呋喃唑酮50～75g。处理剂量：每吨饲料中添加200克土霉素和200克呋喃唑酮（
（2）提高饲料中维生素和微量元素的比例，每隔一周翻一番，可提高雏鸡的孵化率和成活率（
（3）提高饲料质量，蛋白质应保持在18-19%，提高赖氨酸、蛋氨酸和胱氨酸的比例；增加胆碱、维生素B12和维生素E的含量以保护肝脏。为了满足鸡肉的钙需求，30%的蛋壳作为颗粒饲料（
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