禽偏肺病毒(aMPV)是火鸡生产中一种重要的经济病原,在其它家禽品种中也有发现。该病毒在世界一些地区具有重要意义,而世界其他地区的情况尚不清楚。病毒如何影响家禽(
鸡可感染多种呼吸道病毒。近年来,禽偏肺病毒(aMPV)是养鸡业必须对付的一种新病毒。这种病毒引起的疾病最早在土耳其发现,很快这种疾病就成为世界上经济上重要的火鸡疾病。然而,aMPV在鸡体内的感染情况尚不清楚。aMPV引起疾病的重要性在一些国家受到高度关注,但在另一些国家尚未听说
1疾病史
20世纪70年代,南非报道了一种影响火鸡的严重呼吸道疾病。该病传播迅速,发病率高,死亡率不确定(火鸡死亡率可能更高)。有打喷嚏、罗音、鼻窦炎、结膜炎、眼分泌物、鼻漏、产卵量下降等临床症状。该病被称为土耳其气管炎(TRT),世界上许多活鸡生产国均有报道
头肿了。报告说,上世纪90年代,TRT抗体在许多国家被广泛检测到。然而,只有少数国家报告检测到TRT抗原。在蛋鸡中,TRT病原菌直接或间接地引起蛋品质和产蛋量的下降(
2病原学调查
该病的病原学最初被认为是由细菌引起的,大多数怀疑是由禽波氏杆菌引起的,是土耳其常见的一种重要病原体。经鸡胚和气管培养鉴定,TRT的病原为病毒。鸡原病毒及其类似物经鉴定为肺病毒。然而,随着西米的与世隔绝从人群中分离到的lar病毒、该禽病毒和类似分离物被重新分类为禽偏肺病毒(aMPV)。AMPV属于副粘病毒科,肺病毒科和偏肺病毒科。它含有一条没有片段的负链RNA。电镜显示aMPV呈多形性,边缘呈球形
。一段时间以来,人们认为aMPV只有一种血清型。然而,用单克隆抗体和分子生物学方法鉴定出两种不同的血清型,A亚型和B亚型。1997年,在美国科罗拉多州从患有呼吸道疾病的火鸡中分离并鉴定出另一种血清型c在鸭中发现与血清型c相似的aMPV。2000年,从法属火鸡中分离到一株非a、非8、非C亚型毒株,后命名为D血清型(
。除美国、加拿大和澳大利亚外,世界其他地区也有aMPV a、B亚型的报道;血清型c只在美国发现;法国已报道了所有4种血清型(a、B、C和D),但a和B血清型是aMPV感染鸡中最常见的
3种临床表现。如果没有并发感染,感染aMPV的鸡可恢复正常,无多种临床症状。事实上,疾病(或感染)可能经常被注意到。但当与其他呼吸道疾病合并感染时ns(如传染性支气管炎病毒(IBV)、新城疫、传染性喉气管炎、鸡毒支原体、滑膜支原体或其他细菌/真菌),病情会更严重,病程会延长。不适当的管理条件,如通风不良、氨气浓度高、饲养密度大、压力管理操作(如在免疫过程中抓鸡、转鸡)等,会对发病率和病情严重程度产生不利影响。在过去的二十年中,aMPV与肿胀综合征(SHS)的发生有关。后者主要表现为眶周窦和眶下窦肿胀。其他症状包括sne咳嗽、鼻漏、眼漏(图2);斜颈和共济失调已报告在某些情况下。发病率和死亡率通常分别低于4%和2%。其它病原菌(大肠杆菌和IBV)可能与SHS(
共感染,在本实验条件下,aMPV单独感染SPF鸡不引起严重的临床症状。虽然没有观察到明显的呼吸道症状,但当感染鸡的鼻腔被轻轻挤压时,鼻孔中可以看到清晰或浑浊的液体(图3),大约在感染后3-9天出现。小鸡和小鸡很可能有更严重的临床症状。尤其是肉鸡。临床症状几天后就会消失。斜坡感染鸡的cal症状通常只持续一天,然后完全恢复。但鸡感染强毒株aMPV和致病性大肠杆菌后,呼吸道症状加重。目前,SHS人工感染复制试验尚未成功(
在人工感染试验中,仅静脉注射aMPV对蛋鸡产蛋品质和产蛋量有影响。家禽兽医在现场观察到,在某些aMPV感染病例中,产蛋量和蛋壳色素沉着减少。用抗aMPV感染(
4宿主动物的减毒疫苗和灭活疫苗接种可以防止这种损失aMPV已广泛分布于多种家禽中,但火鸡是其主要宿主,其次是鸡。近年来,通过抗原或抗体检测证实,鸡、鸭、珍珠鸡、鸵鸟、海鸥、麻雀等野生候鸟体内存在aMPV感染。事实上,aMPV的C亚型已经在美国的小鼠和大鼠中被检测到。野生鸟类或动物在该病毒传播中的重要性尚不清楚(
5传播
自从该病被确认和发现以来,一直怀疑它是水平传播的。该病主要通过感染和未感染禽类之间的直接接触传播。禽类中受污染的饮用水鸡舍和家禽养殖场的食物或其他材料也可能是潜在的感染源。饲养设备和车辆的移动以及人员的移动也会导致疾病在家禽养殖场内或养殖场之间传播。有人认为病毒可能通过空气传播,但仍需证实。其他可能的感染途径包括家禽养殖场新引进的家禽、家禽饲养场内及周围的野生鸟类(迁徙或本地)。需要强调的是,改善家禽应激的因素(如频繁捕鸡、管理、通风不良、饲养密度过大、环境脏乱(灰尘和氨气含量高、死鸡不能回收利用等)可以改善家禽应激观察家禽对aMPV的敏感性。由于该病毒适合在有不同年龄家禽的农场中生长,因此它可以在生产周期中停留数月或数年,或直到采取适当的预防措施(
为止,目前没有明确的科学证据证明aMPV可以垂直传播。然而,在1日龄雏鸡和雏鸡中检测到aMPV,这可能是由于蛋壳表面的病毒污染(可能通过感染的输卵管)和其他孵化废物(如粪便,皮屑和绒毛)以及新生雏鸡之间的直接接触(
6肉眼和显微镜下的病变
如前所述,单独使用aMPV几乎不会引起明显的临床症状意味着临床病理损害很少见到。但是,如果感染时伴有其他呼吸道疾病,可以看到头颈部皮下水肿,这似乎是由于严重的蜂窝组织炎导致随后在皮肤下积聚胶状或粘稠脓性渗出物所致。其他病理改变包括眼眶窦增大,渗出物清晰或混浊。鼻甲检查显示渗出液中有炎性细胞浸润。部分病例可伴有结膜炎和眼睑增厚(
,由于病变不具特征性,组织病理学检查对aMPV感染的诊断价值不大。局灶性病变,如上皮纤毛脱落和mo感染鸡的鼻甲和气管中常有非核性炎症细胞浸润(在
7免疫
火鸡的父母感染aMPV后,对雏火鸡的母源性抗体(MA)进行了检测,对临床疾病或感染的预防作用似乎很小或没有作用。母体抗aMPV抗体对鸡的保护作用尚未见报道,但可以推测可能存在类似的情况。结果表明,用aMPV活疫苗免疫母源抗体阳性的雏鸡,在数周内不能产生理想的体液抗体(ELISA法检测)。然而,用SPF鸡进行相同的免疫(母鸡为阴性)和aMPV抗体可诱导SPF鸡产生高水平的体液抗体。有趣的是,当这些实验鸡受到aMPV的攻击时,这两种鸡都能完全免受临床疾病的影响。这些结果表明,局部免疫和细胞介导的免疫应答在蛋鸡抗临床疾病和抗感染
中的重要性,大量的实验和现场观察结果证实,高水平的血清aMPV抗体对产蛋和蛋品质有良好的保护作用(如降低褐壳蛋的色素沉着)。因此,体液抗体对蛋鸡(
8dia)生殖器官的保护具有重要意义一旦任何类型的鸡出现与aMPV感染相关的临床症状(表1),必须考虑所有可能的原因,包括与饲养管理和传染病有关的Kainin。蛋鸡的蛋品质和蛋产量下降。通常情况下,多种病原菌同时感染,管理不规范很可能是疾病发生的重要原因。这些因素及其相互作用应引起那些常患多种呼吸道病原体的国家的重视。这一点非常重要,因为鸡感染aMPV可能会被误诊,而且aMPV感染的临床症状与其他常见疾病相似(表2)。因此更重要的是,需要仔细的临床研究以避免混淆。首先,诊断调查可以集中在活鸡身上,然后解剖死鸡并采集标本(
表1一种或多种临床症状
症状
症状
摇头
共济失调
头部肿大
结膜炎感染aMPV的鸡
搔头
兖矿周围水肿
抑郁
眼窝窦扩大
呼吸音
产蛋量减少
斜颈
蛋壳质量下降
眼睛分泌物丰富
表2 aMPV感染鸡的临床症状可能是轻微和暂时的,它常常被忽视或错误地解释为常见原因(呼吸系统症状和产蛋量或蛋壳质量下降)
新城疫
禽脑脊髓炎
传染性支气管炎
维生素A缺乏症
低致病性禽流感
氨
感染在aMPV感染诊断中的应用鸡,应注意以下因素:传染性喉气管炎
尘土飞扬的环境
慢性呼吸道疾病
真菌毒素中毒
掉蛋综合征
热应激
其他因素(参考国内外文献)
8.1病例调查
,采集咽拭子和血棒分别检测抗原或血清抗体的存在。sa的数量每个鸡舍的样本数不应少于20个,在感染鸡出现临床症状前采集棉签样本,可大大提高检出aMPV的概率。因为这不容易做到,所以应该从各种情况的鸡身上采集棉签样本,包括没有明显症状的鸡和临床症状轻微或严重的鸡。如果用于病毒分离,则事先将棉签样品放入病毒分离介质(湿拭子)中,以提高病毒分离的成功率。如果用分子生物学方法检测aMPV的基因组(如逆转录聚合酶链反应、RT-PCR),棉签样品不需要进行培养培养基(即干拭子)(尸检时,可采集鼻甲、气管和肺样本。如果可能,也可以收集眶下窦和气管拭子。如果不能进行尸检和棉签采集,建议将鸡头颈部到胸部的部分,包好,将其放在装满冰块的绝缘容器中,并将其送至专业实验室进行检查(正确运输和保存
样本可提高病毒分离或抗体检测的概率)。用于RT-PCRDry的拭子可在室温下运输和储存,但必须避免阳光直射和高温。用于病毒分离,wet swabs应在冷链中储存和运输,棉签可放在装满冰的聚苯乙烯绝缘容器中。试管或注射器中的全血样本可以在室温下保存一夜,然后交给实验室检测,但最好先分离血清再送去检测。理想情况下,应在冷藏库中储存和运输。血清可以在-20℃冷冻℃. 用于病毒分离的组织样品应尽快送到实验室,最好是在冷藏条件下。如果不能及时提交。组织样本也可以在-70℃低温保存℃ 或者至少-20℃ 运输前(
8.2实验室重新密封检验和分析
实验室应记录从收到样品之日起送检样品的详细信息,在检测到病毒抗原或抗体
之前,无论采用分子或传统方法检测aMPV抗原,样品都可以临时保存,拭子和组织样本需要处理。大多数aMPV的诊断是通过RT-PCR进行的,可以在两天内完成。遗憾的是,这种方法不能为今后的研究提供活病毒。在一些实验中,采用气管器官培养法(TOCS)分离aMPV病毒,以支持A、B亚型的生长。结果表明,大鼠的睫状体运动经免疫荧光或RT-PCR证实aMPV的存在。我们尝试从鸡胚成纤维细胞(CEF)或Vero细胞中分离aMPV的C亚型。除TOC法和VET0细胞培养法外,对易感家禽(主要是幼龄火鸡)的攻击、鸡胚卵黄囊接种等细胞培养方法也被证明可以用于病毒的分离和鉴定。大多数实验室报告他们有能力分离和鉴定aMPV的亚型(图4),但很少有人能通过核苷酸测序(
8.3实验室结果的解释
来区分同一亚型的野生株和疫苗株,这是一个复杂的和有争议的问题用实验室结果解释aMPV感染的结果。重要的是,在得出任何结论之前,家禽疾病调查人员应考虑许多因素,如疾病发生的地区/国家/家禽养殖场、家禽生产历史、临床症状、疾病、疫苗、免疫过程和免疫方法。综上所述,在不使用疫苗预防aMPV的家禽养殖场,如果RT-PCR检测或病毒分离呈阳性,说明该养殖场的家禽感染了aMPV。但众所周知,病毒感染早期的正确采样(主要是指采样时间)对aMPV的检测和鉴定极为重要,因此,aMPV检测的阴性结果不能完全证明家禽没有感染aMPV。因此,需要反复采样以确认是否存在aMPV感染和aMPV抗体的缺乏。用aMPV免疫鸡,抗原抗体阳性检测应结合既往疾病史(如农场或地区的野生病毒和疫苗亚型)、本次使用的疫苗和免疫程序。如果从这次使用的疫苗株中检测到不同的亚型,那么毫无疑问农场中还有其他亚型。如果检测到相同的病毒亚型,进一步的分子检测(如基因测序)可以用来区分疫苗病毒和野生病毒病毒。必须记住,弱毒疫苗(
8.4血清学
试剂盒可用于常规检测抗aMPV血清抗体,然后必须仔细分析和解释检测结果。虽然阳性结果表明家禽感染了aMPV,但阴性结果不能排除家禽没有感染aMPV,因为感染aMPV的鸡不一定产生体液抗体,或者在取样时抗体没有达到可检测水平。为了获得最佳的抗体检测效果,最好使用涂有同系物的ELISA反应板美国抗原。已有报道同源aMPV-ELISA优于异源aMPV-ELISA。事实上,为了检测抗aMPV亚型C的抗体,必须使用ELISA试剂盒(
ELISA试剂盒在许多国家普遍用于检测免疫后的抗体水平。然而,至少在免疫后的最初几周,用活疫苗免疫的阳性鸡不能诱导产生理想水平的血清抗体。异源酶联免疫吸附试验可以掩盖aMPV血清抗体的真实水平。相反,用活疫苗和灭活疫苗免疫的种鸡和蛋鸡可能产生高水平的可检测的体液抗体(
9预防
其它传染病、高标准的生物安全措施和良好的管理是预防鸡感染aMPV的关键。一般来说,aMPV对脂类溶质敏感,但病毒在有机物存在下能存活很长时间。美国的研究表明,ampvc病毒可以在20岁的家禽床上存活4周℃ 37岁时最多2周℃. 因此,有必要采取彻底的卫生消毒措施,防止aMPV在饲养环境中继续存在。农场常用的消毒剂能有效杀灭病毒,但有效浓度应按消毒剂包装标签上的说明配制e(
9.1免疫
aMPV也是一种可以预防的禽呼吸道病毒。在发现aMPV是引起火鸡鼻气管炎(TRT)的原因之后的几年里,已经开发了多种疫苗来保护火鸡免受这种毁灭性疾病的侵害。结果表明,ampva亚型减毒疫苗能提供有效的保护作用。发现ampvb亚型后,交叉保护试验表明,a亚型疫苗能有效地保护免疫家禽免受ampvb亚型的强感染。C亚型疫苗已经在市场上销售,但它只在美国销售,那里的亚型是主要的传染株(由于随着鸡感染aMPV比例的增加,特别是与鸡头肿胀综合征(SHS)和产蛋量下降的相关性,鸡aMPV疫苗的研制取得了成功。活疫苗可在孵化室对一日龄雏鸡进行喷雾免疫。鸡也可以在养鸡场通过喷洒或饮用水的方式接种疫苗。近年来,由于专用的家禽疫苗喷洒设备,可以保证疫苗颗粒均匀,达到对家禽的均匀喷洒效果。因此,越来越多的兽医专家推荐喷雾免疫法(成本低、效果好)。在一些劳动力成本不成问题的国家,滴鼻液和眼药水的方法是c疫苗可用于免疫。aMPV疫苗有时与其他呼吸道疾病的活疫苗一起使用,如新城疫和传染性支气管炎。如果联合使用多种疫苗,最好了解疫苗供应商提供的aMPV疫苗和其他呼吸道活疫苗的相容性。aMPV灭活疫苗通常注射于胸肌或腿部肌肉(
9.2有效保护的保证
预防aMPV感染的免疫效果受多种因素的影响。一般原则是肉鸡接种一次活疫苗,种鸡和蛋鸡接种一次或两次活疫苗,再接种灭活v疫苗一次强化免疫,可有效预防临床疾病和产蛋量/蛋质量下降。作为一种会给养鸡业造成严重经济损失的新病原体,兽医工作人员普遍建议应采用免疫接种的方法来预防aMPV(
一般来说,许多养鸡户反映,实施aMPV疫苗接种后,鸡的死亡率下降,增重增加,饲料转化率提高,产蛋量和蛋品质稳定,呼吸道病例减少。然而,在一些家禽养殖场,免疫效果可能被其他病原体、不适当的生物安全措施和/或r管理相关问题(
10结论
根据当地疫情,现代养鸡业主要集中在常见呼吸道疾病的防治上,如nd、IB、传染性喉气管炎(ILT)、鸡痘(AP)、慢性呼吸道疾病(CRD)。根据作者目前对aMPV的理解,如果我们不保护相对较新的鸡病原体或低估aMPV对鸡的健康和难以捉摸的疾病的产生的影响,那将是一个巨大的错误(
原标题:禽偏肺病毒:鸡的弹性病理学
原作者:ganathy Kannan博士(家禽病理学专家,英国利物普大学
周宗青从世界译成贫困2007,第23卷,第4期:36~37:5:35~37