养鸡场常用的禽流感检测方法简介
介绍家禽饲养场常用的禽流感检测方法
。检测禽流感的方法很多。病毒检测方法一般有瓜尔豆分离法、病毒毛巾和试验法、血凝试验和血凝抑制试验法、神经氨酸酶抑制试验法、琼脂凝胶扩散试验法、免疫荧光试验法、酶联免疫吸附试验法、胶体金免疫层析法等，单链构型多态性，逆转录聚合酶链反应，多重逆转录聚合酶链反应，实时逆转录聚合酶链反应，核酸序列依赖性扩增，环介导等温聚合酶链反应ain反应、基因芯片等，但限于资金、设备和技术卡¨ 为了检测时间休闲元素，血凝抑制试验和胶体金快速诊断试纸是包括养殖场在内的养鸡场常用的两种方法。有条件的养鸡场也采用酶联免疫吸附试验和逆转录聚合酶链反应。以下简要介绍了相关方法及其应用价值（
1日益边缘化抗体检测
血凝抑制试验（HI）用于测定大多数养鸡场的抗体效价，如成年鸡的平均抗体效价是否在28以上；第二，抗体是否透明质酸它是一个大的分散甚至“犬”分布，以确定鸡是否感染了野生病毒。但判断是否感染了野生病毒的前提是疫苗病毒和野生病毒应高度一致。但在实际生产中，禽流感病毒常发生变异，每到新年左右，就会出现1-2株主要的禽流感强毒株，它能突破疫苗抗体，给予每日抗体达到疫苗防疫水平，并给日常养鸡场的疫苗防疫水平造成巨大损失。即使是个别祖传养鸡场也难逃毁灭性打击。因此，抗体检测ca只检测疫苗防疫后产生的疫苗抗体数量，不能显示这些抗体对野生株的保护率，2010年至2011年，我国多个省份共分离到10余株病毒，标准疫苗阳性血清的覆盖率（病毒中和率）仅为3%-25%
。这也意味着野生病毒感染的抗体检测需要用分离的野生病毒株来检测，而不是标准株，因此，抗体检测方法在诊断禽流感野生病毒感染方面的有效性大大降低。作为一种手段，它越来越被边缘化。胶体金直接测定跛足病快速诊断抗原的st条带法越来越受到人们的重视（
应该指出，重组病毒是从旧的野生型病毒株的血凝素基因片段中切下几个“有害”碱基制成的，然后通过基地帮派营救的方式将其“嫁接”到人流感H1N1毒株上。这种方法提高了疫苗的“安全性”，大大提高了疫苗的产量，但其保护率会大打折扣，效率比必须低于野生株。不少育种朋友常问，现在流行的菌株是“再（重组）拓济”吗？事实上，自然界根本没有这种紧张。它是一种人工菌株，其部分成分（内部基因）仍然是H1N1，与真正的H5N1毒株
2不同的是，越来越多的胶体金试纸条被用于禽流感
的快速诊断。抗AIV保守核衣壳蛋白的单克隆抗体用于捕获不同亚型的AIV毒株。它不需要任何特殊设备，可现场操作，特异性好，灵敏度高，可被金颗粒着色。十几分钟就能看到探测效果。它类似于早孕试纸的使用。这很简单而且实用，价格低廉。由于抗体检测不能准确反映疫苗对野生病毒的保护率和病毒变异时鸡场的生物安全性，直接捕获病毒的胶体金试纸法在养鸡场疾病诊断中越来越流行（
，很多养殖朋友在确认禽流感病毒后，也要求通过试纸法对禽流感病毒进行分型。国外已有H5、H7、H9亚型禽流感胶体金试纸，我国禽流感病毒株系变化迅速。血凝素的一些关键抗原位点已被证实愤怒。因此，这些胶体金试纸条只能用于2010年以前的毒株，其试纸条检测不到2010年以后的许多流行毒株，如目前禽流感H5N1血凝素基因进化树中的7个分支病毒。有效的试纸取决于新菌株制备的新单克隆抗体，由于使用了针对保守蛋白的单克隆抗体（
，胶体金试纸条对这些变异株的检测仍然有效。禽流感抗原（病毒）胶体金抗原的检测方法与抗体检测的取样要求不同。抗体检测需要一定比例的样本量才能重复发送抗体的分布。抗原检测采样量小。只要检测到病毒，就意味着养鸡场有病毒感染，准确率非常高，同时，禽流感油乳剂灭活疫苗是以油包水的形式生产出来的，并缓慢地释放到组织中。它不能到达呼吸道、肠道、泄殖腔等试纸部位，因此试纸会检测出疫苗中的灭活病毒。灭活疫苗的使用不影响试纸（
对野生病毒的检测，在这种情况下，如果需要对病毒进行分型，则需要进行聚合酶链反应，以扩增特异性鉴定反倾销基地
3其他检测方法
如果有条件的养鸡场有酶标仪和聚合酶链反应（PCR），我们会用免疫吸附法（ellsa）和PCR法检测禽流感病毒ELISA也可以通过检测抗体来检测病毒，但由于缺乏像胶体金法那样有效的新型单克隆抗体，病毒的分型仍然受到限制。它的分型工作仍然会遇到一些流行病毒株不能分型的困难。另外，由于ELISA方法制备费用高、操作时间长，且不具有灵敏度和特异性的优点。在禽流感的检测中，已逐渐被胶体金免疫法所取代无设备，运行时间短，价格低。PCR方法的设计是为了能够更好地对禽流感进行分类，但需要根据禽流感病毒株系的变异情况，从疾病材料的采集、冻融、RNA提取和逆转录、基因扩增、DNA测序等方面设计新的引物，DNA测序琼脂凝胶电泳和紫外荧光检测特异片段。该方法除了设备昂贵、检测方案成本高外，对操作人员和操作条件也有较高的技术要求。为实现禽流感的有效防控，有条件的养鸡场收集病料后可结合胶体金纸片法、EUSA法、PCR法等多种检测方法对病毒的碱基图片段进行测序，绘制病毒碱基的遗传进化图，为下一步的疾病防控
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